| 产品名 | A-443654 |
| CAS号 | 552325-16-3 |
| 目录号 | D811125 |
| 化学式 | C₂₄H₂₃N₅O |
| 分子量 | 397.48 |
| 溶解度 | ≥ 19.85 mg/mL in DMSO, ≥ 44.3 mg/mL in EtOH |
| 靶点 | Akt inhibitor,potent and selective |
| 储存条件 | Store at -20°C |
| 用途 | 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗 |
靶点及简介 ：Akt inhibitor,potent and selective.
A-443654 是有效的 Akt1/2/3 抑制剂，抑制Akt1的 Ki 为160 pM。
体外研究
A-443654的Ki值为160 pM，相对于初始的铅分子，效力提高了30,000倍。对于Akt而言，A-443654对PKA的选择性是40倍。 A-443654在细胞内同等地抑制Akt1，Akt2或Akt3。 A-443654在所有三种细胞系中以剂量反应方式降低P-GSK3。 A-443654抑制肿瘤细胞的增殖，EC50为0.1μM[1]。在10A和10CA1a细胞中，A-443654诱导的形态变化非常快速地发生（在2至4小时内），其中10CA1a细胞对A-443654比对10A细胞更敏感。单独的A-443654（2μM）导致10CA1a细胞（但不是10A细胞）在12小时后从板上脱离，而1μM的A-443654使得10CA1a细胞在12小时后从板上脱离。 FACScan分析雷帕霉素和A-443654对10A和10CA1a细胞DNA含量的影响。相比之下，2和5μM的A-443654在8小时的10CA1a细胞中使Bcl-2水平降低30％至40％。然而，雷帕霉素与2或5μMA-443654的组合在10A细胞中显着降低了Bcl-2蛋白水平40％至50％，在10CA1a细胞中显着降低了约70％[2]。与WT细胞相比，A-443654显示出对突变细胞的最大选择性作用，突变细胞的相对生长抑制大于3.5倍[3]。
体内研究
A-443654（7.5mg / kg / d，sc）抑制3T3-Akt1侧腹肿瘤模型中的肿瘤生长。 A-443654（50mg / kg，sc）诱导3T3-Akt1侧腹肿瘤中的细胞凋亡。 A-443654（30 mg / kg，sc）导致MiaPaCa-2肿瘤中磷酸化Akt1水平升高[1]。
细胞实验
用200μLPBS轻轻洗涤96孔板上的细胞。 Alamar Blue试剂在正常生长培养基中1:10稀释。将稀释的Alamar Blue试剂（100μL）加入到96孔板上的每个孔中，并按照制造商的说明进行温育直至反应完成。使用fmax荧光微量板读数器进行分析，设置在544nm的激发波长和595nm的发射波长。使用制造商提供的SOFTmax PRO软件分析数据。
动物实验 免疫功能低下的雄性scid小鼠为6至8周龄。 3T3-Akt1细胞系在我们的实验室中开发和表征。将50％基质胶中的1×106 3T3-Akt1或2×106 MiaPaCa-2和PC-3细胞皮下接种到侧腹。对于早期治疗研究，将小鼠随机分配至治疗组，并在接种后第二天开始治疗。每组分配10只动物，包括对照组。对于已建立的肿瘤研究，允许肿瘤达到指定的大小，并将小鼠分配到具有相等肿瘤大小的治疗组（每组n = 10只小鼠）。通过使用数字卡尺每周两次测量来评估肿瘤大小。使用下式估算肿瘤体积：V = L×W2 / 2。 A-443654在0.2％HPMC的载体中给予sc。 A-674563在5％葡萄糖的载体中口服给药。
验证：
参考文献：
| DMSO | 79 mg/mL (198.76 mM) |
| Ethanol | 79 mg/mL (198.76 mM) |
| Water | Insoluble |
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
|---|---|---|---|
| 1 mM | 2.52 mL | 12.58 mL | 25.16 mL |
| 5 mM | 0.50 mL | 2.52 mL | 5.03 mL |
| 10 mM | 0.25 mL | 1.26 mL | 2.52 mL |
| 50 mM | 0.05 mL | 0.25 mL | 0.50 mL |
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