CEP-32496：一种高效口服BRAFV600E抑制剂

概述

CEP-32496是一种口服高效的BRAFV600E抑制剂，其结合亲和力Kd值为14 nM。该化合物在多种BRAFV600E依赖性细胞系中显示出显著活性，并对突变型BRAFV600E肿瘤细胞具有选择性细胞毒性。

靶点活性谱

CEP-32496对多个激酶靶点表现出不同的抑制活性：

• 高亲和力靶点 (Kd ≤ 14 nM):

  • BRAFV600E: 14 nM
  • c-Kit: 2 nM
  • Ret: 2 nM
  • LCK: 2 nM
  • Abl-1: 3 nM

• 中等亲和力靶点:

  • VEGFR-2: 8 nM
  • CSF-1R: 9 nM
  • EPHA2: 14 nM
  • EGFR: 22 nM
  • Braf: 36 nM
  • CRAF: 39 nM

• 低亲和力靶点:

  • c-Met: 513 nM
  • JAK-2: 4700 nM
  • MEK-1: 7100 nM
  • MEK-2: 8300 nM

体外研究结果

CEP-32496在细胞水平表现出优异的生物活性：

• pMEK抑制IC50: 82 nM
• A375细胞增殖抑制IC50: 78 nM

该化合物还显示出良好的药物代谢特性：

• 对CYP1A2、CYP2C9、CYP2D6和CYP3A4的IC50值均大于10 μM
• 对CYP2C19的IC50值为3.4 μM

体内药效学研究

在携带Colo-205肿瘤异种移植模型的小鼠中：

• 单次30 mg/kg口服剂量在给药后2小时和6小时分别实现50%和75%的pMEK抑制
• 55 mg/kg剂量在给药后2-10小时内维持57%-75%的pMEK抑制

药代动力学特征

CEP-32496在不同物种中表现出优异的药代动力学特性：

比格犬：

• 清除率：5.0 mL/min/kg
• 生物利用度：100%

食蟹猴：

• 清除率：6.7 mL/min/kg
• 生物利用度：100%

实验方法

激酶实验：采用KINOMEscan竞争结合测定法，使用11次连续3倍稀释测定Kd值。

细胞实验：使用A375细胞系，通过荧光信号强度定量剩余活细胞数量。

动物实验：使用无胸腺nu/nu裸鼠建立Colo-205肿瘤模型，每日两次口服给药14天。

参考文献

Rowbottom MW, et al. Identification of 1-(3-(6,7-dimethoxyquinazolin-4-yloxy)phenyl)-3-(5-(1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-yl)isoxazol-3-yl)urea hydrochloride (CEP-32496), a highly potent and orally efficacious inhibitor of V-RAF murine sarcoma viral oncogene homologue B1 (BRAF) V600E.