成功加入购物车！
再逛逛
去结算
| 规格 | 价格 | 库存 | 数量 |
|---|---|---|---|
| 10mg | ￥ 924.00 | 100 | |
| 25mg | ￥ 1675.00 | 100 |
| 别名 | E-616452，SJN 2511,ALK5 Inhibitor II |
| 产品名 | RepSox |
| CAS号 | 446859-33-2 |
| 目录号 | D807223 |
| 化学式 | C₁₇H₁₃N₅ |
| 分子量 | 287.32 |
| 溶解度 | ≥ 14.35 mg/mL in DMSO, ≥ 47.9 mg/mL in EtOH with gentle warming |
| 靶点 | ALK5 inhibitor,potent and selective |
| 储存条件 | Store at -20°C |
| 用途 | 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗 |
| 纯度 | >99% |
靶点及简介 ：ALK5 inhibitor,potent and selective
RepSox (ALK5 Inhibitor II)是一种有效的，选择性TGFβ/ALK5抑制剂，ATP与ALK5结合以及ALK5自磷酸化时， IC50分别为23 nM和4 nM。RepSox抑制ATP结合到ALK5和抑制ALK5自磷酸化，IC50分别为23 nM和4 nM。RepSox抑制TGF-β 诱导的细胞PAI-1荧光素酶活性，IC50为18 nM。RepSox在重编程中通过抑制转化生长因子-β(Tgf-β)信号，能够成功取代Sox2，这反过来又导致Nanog表达。
| 分子量 | 287.32 | ||
|---|---|---|---|
| 化学式 | C17H13N5 | ||
| CAS号 | 446859-33-2 | ||
| 储存条件 | 3年 | -20°C | 粉状 |
| 1年 | -80°C | 溶于溶剂 | |
体外研究
RepSox还抑制ATP与ALK5的结合，IC50为23 nM。 RepSox在结合和细胞测定中显示出有效的活性，并且表现出对p38丝裂原活化蛋白激酶的选择性。 IC50>16μM[1]。 RepSox作为Tgfβ1激酶的抑制剂起作用。用25μMRepSox处理几乎完全消除了Smad3磷酸化，表明RepSox强烈抑制体细胞中的Tgfβ信号传导。在转导后第10-11天，RepSox最有效地替换Sox2，因此Oct4，Klf4和cMyc转导的MEF的培养物产生能够响应RepSox处理的中间体。这些中间体在转导后第4天出现并在第10-11天达到峰值。用RepSox处理降低了细胞周期G2 / M期细胞的比例，表明它不会增加这些部分重编程细胞的增殖率[2]。
激酶实验
通过PCR克隆ALK5的激酶结构域，并在杆状病毒/ Sf9细胞系统中表达。蛋白质在C末端标记为6-His，并使用Ni2 +柱通过亲和层析纯化，并且所获得的材料用于评估自磷酸化测定中的化合物活性。将纯化的酶（10nM）在50μLTris缓冲液（Tris 50mM，pH 7.4; NaCl，100mM; MgCl 2,5mM; MnCl 2,5mM;和DTT，10mM）中温育。将酶与不同浓度的RepSox（试验中0.1％DMSO终浓度）在37℃下预孵育10分钟。然后通过加入3μMATP（0.5μCiγ-33P-ATP）引发反应。在37℃下15分钟后，通过加入SDS-PAGE样品缓冲液（50mM Tris-HCl，pH 6.9,2.5％甘油，1％SDS和5％β-巯基乙醇）终止磷酸化。将样品在95℃下煮沸5分钟并在12％SDS-PAGE上电泳。将干燥的凝胶暴露于荧光屏过夜。使用Storm成像系统[1]量化ALK5自身磷酸化。
细胞实验
为了测试化合物的抗TGF-β活性，将HepG2细胞以每孔35000个细胞的浓度接种在96孔微孔板中，在200μL含血清的培养基中。然后将微孔板在37℃，5％CO 2 atm的细胞培养箱中放置24小时。然后在加入重组TGF-β（1ng / mL）之前，以50nM至10μM（DMSO的最终浓度为1％）的浓度加入溶于DMSO中的RepSox 30分钟。孵育过夜后，用PBS洗涤细胞并通过加入10μL被动裂解缓冲液裂解。相对于对照组抑制荧光素酶活性用作化合物活性的量度。构建浓度 - 响应曲线，从中以图形方式确定IC50值[1]。
验证：
参考文献：
| DMSO | 57 mg/mL (198.39 mM) |
| Water | Insoluble |
| Ethanol | Insoluble |
| 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
| 1 mM | 3.4804 mL | 17.4022 mL | 34.8044 mL |
| 5 mM | 0.6961 mL | 3.4804 mL | 6.9609 mL |
| 10 mM | 0.3480 mL | 1.7402 mL | 3.4804 mL |
| 50 mM | 0.0696 mL | 0.3480 mL | 0.6961 mL |
请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液。
一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。储备液的保存方式和期限：-80°C 储存时，请在 6 个月内使用，-20°C 储存时，请在 1 个月内使用。（为了提高溶解度，请将管子加热至37℃，然后在超声波浴中震荡一段时间)。
我们确保产品在保持试剂质量的条件下运输。收到产品后，请遵循产品数据表上的存储建议。
长按屏幕识别二维码
打开手机扫描二维码
