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Coelenteramine 400a是Coelenterazine衍生物，用作海肾荧光素酶底物，在395 nm处发射蓝光，广泛应用于生物发光研究。

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参数

别名	Coelenterazine 400a; Bisdeoxycoelenterazine，腔肠素400a
产品名	Coelenterazine 400a
CAS号	70217-82-2
化学式	C₂₆H₂₁N₃O
分子量	391.5
溶解度	Ethanol: 0.5 mg/ml ,Methanol: 0.5 mg/ml
靶点	Coelenterazine 400a is a bisdeoxy derivative of coelenterazine that displays an emission maximum of 395 nm following conversion by Renilla luciferase (Rluc).
储存条件	Store at -20°C,protect from light
用途	仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗

产品安全说明书

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Coelenteramine 400a（腔肠素400a）生物活性靶点及简介：

Coelenteramine 400a（又称Coelenterazine 400a）是Coelenterazine的衍生物，作为一种海肾荧光素酶（RLuc）底物，在生物发光研究中具有重要作用。当与RLuc酶反应时，该化合物能够在395 nm波长处发射蓝光。

这种衍生物通过取代亚甲基桥的硫和氧杂原子，导致RLuc生物发光反应发生色变。相较于传统底物，Coelenteramine 400a提供了更高的信号分辨率，使其特别适用于生物发光共振能量转移（BRET）研究领域。

体外研究指南

以下为推荐的实验方案，研究人员可根据具体需求进行调整：

溶液制备：

光谱记录：使用配备液氮冷却CCD探测器的多通道光谱仪记录混合溶液的生物发光光谱。实验前需用500 W光谱辐照度标准灯校准光谱仪的绝对光谱灵敏度。
参数测定：采用定制的光电倍增管光度计（H11890-01，Hamamatsu Photonics，Japan）测定生物发光反应相关参数。光度计的绝对响应度需通过积分球光谱仪校准，建立相对计数值与绝对值的线性关系。
反应监测：在试管中预先加入5-15 μL浓度为10 nM的Coelenteramine 400a溶液，随后注入150 μL浓度为20 μg/mL的荧光素酶溶液（溶解于0.1 M GTA缓冲液，pH分别为6.0、7.0和8.0）启动反应。监测反应直至完全，根据获得的总光子数和荧光素分子数计算生物发光反应量子产率。
动力学分析：使用Lineweaver-Burk图计算底物Coelenteramine 400a的米氏常数（Km）和催化常数（kcat）。
荧光特性测定：使用Quantaurus-QY在300 nm激发光条件下测量氧化产物Coelenteramide 400a（CTMD 400a）的荧光光谱和绝对荧光量子产率，测量时CTMD 400a在DMSO中的浓度为20 μM。

Levi J, et al. Bisdeoxycoelenterazine derivatives for improvement of bioluminescence resonance energy transfer assays. J Am Chem Soc. 2007 Oct 3;129(39):11900-1.
Bertrand L, et al. The BRET2/arrestin assay in stable recombinant cells: a platform to screen for compounds that interact with G protein-coupled receptors (GPCRS). J Recept Signal Transduct Res. Feb-Nov 2002;22(1-4):533-41.