| 别名 | 腔肠素h; 2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h |
| 产品名 | Coelenterazine h |
| CAS号 | 50909-86-9 |
| 化学式 | C₂₆H₂₁N₃O₂ |
| 分子量 | 407.5 |
| 溶解度 | Ethanol: 0.5 mg/ml*,Methanol: 0.5 mg/ml* |
| 靶点 | Coelenterazine is a luciferin, a light-emitting biomolecule that serves as a substrate for luciferases or as a constituent of photoproteins, including aequorin. |
| 储存条件 | Store at -20°C |
| 用途 | 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗 |
腔肠素h(Coelenterazine h)是一种发光底物,属于腔肠素类化合物,专门作为RLuc8荧光素酶的底物使用。该化合物对钙离子(Ca²⁺)表现出极高的敏感性,特别适用于检测细胞内钙离子浓度的微小变化。
腔肠素h作为腔肠素的衍生物,在钙离子敏感性方面优于其天然复合物,这使其成为测量钙离子浓度变化的宝贵工具。该化合物的激发波长为437 nm,发射波长为466 nm,具有良好的光学特性。
研究表明,腔肠素h在1-10 μM浓度范围内可有效作为RLuc8的发光底物。在BRAC蛋白的钙离子结合动力学测量实验中,研究人员将5 nM BRAC蛋白与20 μM腔肠素h在不同浓度的钙离子缓冲液中快速混合,随后以1 kHz的频率监测BRAC蛋白在Venus通道(530 nm)的发射强度变化。
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| 1 mg | 5 mg | 10 mg |
| 1 mM | 2.454 mL | 12.2699 mL | 24.5399 mL |
| 5 mM | 490.8 μL | 2.454 mL | 4.908 mL |
| 10 mM | 245.4 μL | 1.227 mL | 2.454 mL |
储存液配置:
工作液配置:
细胞准备:使用适当的转染试剂(如Lipo2000 Transfection Reagent)向Hela细胞中转染编码RLuc8荧光素酶报告基因的质粒
染色处理:向细胞培养板中加入配制好的10 μM腔肠素h工作液
孵育条件:将加样后的细胞板置于37℃、5% CO₂的培养箱中,避光孵育1-4小时(具体时间需根据实验条件优化)
检测方法:染色完成后立即使用荧光显微镜进行检测,建议设置激发/发射波长为437/466 nm
腔肠素h在1-10 μM浓度范围内能够有效作为RLuc8报告基因的发光底物。在溶液体系的BRAC蛋白钙离子结合动力学测量中使用的实验条件(5 nM BRAC蛋白与20 μM腔肠素h的配比)可为细胞染色实验提供参考。
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