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首页 Others Dyes Coelenterazine h,腔肠素h; 2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h(CAS#50909-86-9 目录号D943292)
Coelenterazine h(2-脱氧腔肠素)是RLuc8发光底物,对Ca²⁺高度敏感,适用于检测Ca²⁺浓度微小变化,激发/发射波长为437/466 nm。

规格 价格 库存 数量
500µg ¥ 3098.00 100
1mg ¥ 5884.00 100
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参数
别名 腔肠素h; 2-Deoxycoelenterazine; CLZN-h
产品名 Coelenterazine h
CAS号 50909-86-9
化学式 C₂₆H₂₁N₃O₂
分子量 407.5
溶解度 Ethanol: 0.5 mg/ml*,Methanol: 0.5 mg/ml*
靶点 Coelenterazine is a luciferin, a light-emitting biomolecule that serves as a substrate for luciferases or as a constituent of photoproteins, including aequorin.
储存条件 Store at -20°C
用途 仅供科学研究使用!不能用于人体及动物治疗
产品安全说明书
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Coelenterazine h腔肠素h:高灵敏度钙离子检测底物的特性与应用

生物活性靶点与特性

腔肠素h(Coelenterazine h)是一种发光底物,属于腔肠素类化合物,专门作为RLuc8荧光素酶的底物使用。该化合物对钙离子(Ca²⁺)表现出极高的敏感性,特别适用于检测细胞内钙离子浓度的微小变化。

腔肠素h作为腔肠素的衍生物,在钙离子敏感性方面优于其天然复合物,这使其成为测量钙离子浓度变化的宝贵工具。该化合物的激发波长为437 nm,发射波长为466 nm,具有良好的光学特性。

体外研究与应用

研究表明,腔肠素h在1-10 μM浓度范围内可有效作为RLuc8的发光底物。在BRAC蛋白的钙离子结合动力学测量实验中,研究人员将5 nM BRAC蛋白与20 μM腔肠素h在不同浓度的钙离子缓冲液中快速混合,随后以1 kHz的频率监测BRAC蛋白在Venus通道(530 nm)的发射强度变化。

实验操作指南

溶液制备


1 mg5 mg10 mg
1 mM2.454 mL12.2699 mL24.5399 mL
5 mM490.8 μL2.454 mL4.908 mL
10 mM245.4 μL1.227 mL2.454 mL

储存液配置

  • 溶剂选择:甲醇或乙醇
  • 推荐浓度:10 mM(可根据实验需求优化)
  • 储存条件:未使用的储存液应分装后于-20℃或-80℃避光保存,避免反复冻融

工作液配置

  • 稀释溶剂:PBS或细胞培养基
  • 推荐浓度:10 μM(可根据实验需求调整)
  • 使用原则:现用现配,避光保存

细胞染色流程

  1. 细胞准备:使用适当的转染试剂(如Lipo2000 Transfection Reagent)向Hela细胞中转染编码RLuc8荧光素酶报告基因的质粒

  2. 染色处理:向细胞培养板中加入配制好的10 μM腔肠素h工作液

  3. 孵育条件:将加样后的细胞板置于37℃、5% CO₂的培养箱中,避光孵育1-4小时(具体时间需根据实验条件优化)

  4. 检测方法:染色完成后立即使用荧光显微镜进行检测,建议设置激发/发射波长为437/466 nm

应用注意事项

腔肠素h在1-10 μM浓度范围内能够有效作为RLuc8报告基因的发光底物。在溶液体系的BRAC蛋白钙离子结合动力学测量中使用的实验条件(5 nM BRAC蛋白与20 μM腔肠素h的配比)可为细胞染色实验提供参考。


参考文献

  1. Saito K, Hatsugai N, Horikawa K, et al. Auto-luminescent genetically-encoded ratiometric indicator for real-time Ca2+ imaging at the single cell level. PLoS One. 2010;5(4):e9935.

  2. Jiang T, et al. New bioluminescent coelenterazine derivatives with various C-6 substitutions. Org Biomol Chem. 2017;15(33):7008-7018.

  3. Knight MR, et al. Imaging calcium dynamics in living plants using semi-synthetic recombinant aequorins. J Cell Biol. 1993;121(1):83-90.

  4. Suzuki K, et al. Five colour variants of bright luminescent protein for real-time multicolour bioimaging. Nat Commun. 2016;7:13718.

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